Prueba de esterilidad

Describir el procedimiento para la ejecución de la prueba de esterilidad de productos terminados estériles conforme a los métodos farmacopeicos vigentes.

Alcance

Aplica a todos los productos estériles fabricados en la planta: inyectables, oftálmicos, soluciones parenterales y cualquier producto que declare ser estéril en su etiqueta.

Responsabilidades

Analista de microbiología

Ejecutar la prueba en el aislador o cabina de bioseguridad según la técnica de filtración por membrana o inoculación directa.

Jefe de Microbiología

Revisar los resultados, aprobar la interpretación y gestionar cualquier resultado positivo.

Evaluar las implicaciones de un resultado positivo para la liberación del lote.

Procedimiento

Selección de muestras

Seleccionar las unidades de muestra según el tamaño de lote definido en la farmacopea: mínimo 20 unidades para lotes industriales. Incluir unidades del inicio, medio y final del llenado. Las muestras deben ser representativas del lote.

Preparación del área y equipos

Realizar la prueba en un aislador validado o en una cabina de flujo laminar Clase A dentro de ambiente B. Verificar la integridad del aislador (prueba de guantes), esterilizar las superficies internas y verificar los medios de cultivo.

Aptitud del método (si aplica)

Verificar que el producto no tiene actividad antimicrobiana que interfiera con la prueba. Si la tiene, aplicar técnicas de neutralización, dilución o filtración para eliminar la interferencia. Validar con los microorganismos de reto definidos en farmacopea.

Filtración por membrana

Transferir asépticamente el contenido de las unidades al sistema de filtración. Filtrar a través de membrana de 0.45 µm. Enjuagar con el diluyente apropiado. Transferir cada membrana a un recipiente de medio: TSB (bacterias/hongos aerobios) y FTM (anaerobios/aerobios).

Incubación

Incubar FTM (Fluid Thioglycollate Medium) a 30-35°C y TSB (Tryptic Soy Broth) a 20-25°C durante un mínimo de 14 días. Inspeccionar visualmente los medios cada 2-3 días en busca de turbidez u otro signo de crecimiento.

Lectura e interpretación

Si no hay crecimiento a los 14 días: el lote cumple la prueba de esterilidad. Si hay crecimiento: investigar antes de invalidar. Solo se puede invalidar si se demuestra que la contaminación fue introducida durante la prueba (no del producto).

Gestión de resultado positivo

Si se confirma un resultado positivo: no liberar el lote, identificar el microorganismo, investigar la fuente (producto vs laboratorio), revisar otros lotes, evaluar el proceso de manufactura, abrir desviación.

Referencias normativas

USP <71>Ph. Eur. 2.6.1FDA Guidance: Sterile Drug ProductsOMS TRS 961 Anexo 6

Lección relacionada en el curso

Profundizar en este tema →

← AnteriorMonitoreo microbiológico ambiental Siguiente →Prueba de endotoxinas bacterianas (LAL)